②利用表达单克隆抗体研究病毒结构蛋向的功能及结构蛋白 抗原位点分析:应用病毒单克隆抗体研究发现 , 针对病毒糖蛋白 ^和单克隆抗体多数具有不同程度的中和活性或血凝抑制活 性(两者均有或其中一种);而针对核蛋白的单克隆抗体大多数
既无中和活性 , 也无血凝抑制活性 , 表明病毒蛋白的中和抗原决 定簇和HA主要存在于外膜糖蛋白和G2上 。
单克隆抗体交叉 反应研究表明 , (单克隆抗体的中和作用多针对本型或本株的 , 而G2单克隆抗体中和活性和血凝活性可针对多型病毒或毒株 ,
即q主要表现型或株的中和抗原 , 而G2表现为组特异性中和 抗原和血凝活性 。
(2)汉坦病毒的分型:g前 , 国内外学者应用空斑减少中和 试验(PRNT)、微量细胞病变中和试验(MCPENT)、逆转录- 聚合酶链式反应(RT-PCR)和酶切分析、单克隆抗体技术、 寡核苷酸指纹图及核苷酸序列分析、放射免疫沉淀(RIP)和蛋 白印迹试验(Western-blot)、血凝抑制试验(HI)、反向被动 血凝抑制试验(RPHI)、免疫酶斑点法(IEDA)及酶联免疫吸 附试验(EIJSA)等技术 , 对不同来源的汉坦病毒进行分型研 究 , 发现汉坦病毒至少有9种血清型 , 分别来自不同种类宿主动 物 , 抗原性有明显的差异 。
【汉坦病毒的研究有何进展?】(3)两种新的导致人类疾病的汉坦病毒的发现:1993年舂 末夏初 , 在美国西南部的新墨西哥州、科罗拉多州、犹他州和亚
利桑那州四州交界地区(four corners
region )爆发了一种新的疾 病 , 该病主要临床表现为发热、呼吸衰竭及休克 , 多数病人在发
病数天后死亡 , 病死率高达60% 。
同年6月 , 研究人员用IFA
和ELISA方法从患者血清中检测出可以和汉坦病毒抗原有交叉 反应的IgG和IgM抗体 。研究人员根据PUU和PH病毒的核苷 酸序列设计引物 , 用套式PCR方法 , 从患者的肺脏和其他组织
中扩增到汉坦病毒的核苷酸序列 , 证实了血清学的结果 。
进一步 对PCR产物进行序列测定证实 , 此次爆发的疾病由一种新的汉
坦病毒引起 。流行病学研究发现 , 鹿鼠(deer
mouse, peromusci^maTiici^ato)是这种汉坦病毒的主要宿主动物 , 该
地区鹿鼠中汉坦病毒抗体阳性率很高 。
应用Vero-E6细胞从鹿 鼠和病人尸解标本中分离到病毒 。该病毒最初以发现地区命名为 四角病毒(four comers virus, FCV) , 后将FCV重新命名为sin nombre virus (SNV) , 即无名病毒 。由该病毒引起的疾病命名为
汉坦病毒肺综合征(Hantavirus
pulmonary syndrome, HPS) 。
另一新发现的汉坦病毒是多布拉伐/贝尔格莱德病毒(Do-
brava/Belgrade virus) 。该病毒与汉滩病毒明显不同 , 宿主动物亦
为黑线姬鼠 , 是南斯拉夫重型HFRS的病原 。
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